+
trattamento della cataratta bendazac US 4451477 A Si è scoperto che bendazac, o [(1-benzil-1H-indazol-3-il) ossi] acetico, quando somministrato in una forma adatta per ottenere concentrazioni tissutali terapeutiche, determina una regressione della cataratta. È stato dimostrato in particolare, che il sale di lisina di bendazac è ben adattato per questo uso in quanto produce concentrazioni tissutali adeguate per somministrazione orale e l'applicazione topica sull'occhio. Le caratteristiche chimiche e fisiche di questo sale bendazac sono descritti qui insieme alle tecniche di preparazione. Патентная формула (11) 1. Metodo per il trattamento della cataratta in un essere umano comprendente la somministrazione a detto umana una quantità terapeuticamente efficace di bendazac. 2. Metodo per il trattamento della cataratta secondo la rivendicazione 1, in cui detto bendazac viene somministrato per via orale. 3. Un metodo per il trattamento della cataratta secondo la rivendicazione 2, in cui detto bendazac è somministrato in una quantità sufficiente ad ottenere un livello ematico efficace di 20-40 pg / ml nell'intervallo 455 a 1824 mg al giorno in un farmaceutica accettabile formare adatto per ottenere concentrazioni tissutali efficaci. 4. Metodo per il trattamento della cataratta secondo la rivendicazione 3, in cui detto bendazac viene somministrato in forma di un sale di lisina. 5. Metodo per il trattamento della cataratta secondo la rivendicazione 4, in cui detto sale di lisina bendazac viene somministrato ad un dosaggio da 750 a 3000 mg al giorno. 6. Metodo per il trattamento della cataratta secondo la rivendicazione 5, in cui detto sale di lisina bendazac è somministrato suddiviso in 2 o più dosi al giorno. 7. Procedimento per il trattamento della cataratta secondo la rivendicazione 1, in cui detto bendazac viene somministrato direttamente l'occhio interessato. 8. Un metodo per il trattamento della cataratta secondo la rivendicazione 7, in cui detto bendazac viene somministrato in forma di un veicolo farmaceutico accettabile nella concentrazione nel range di 0,1-1 per cento. 9. Un metodo per il trattamento della cataratta secondo la rivendicazione 8, in cui detto bendazac viene somministrato da 2 a 3 volte al giorno, la quantità di 3 gocce per ogni applicazione. 10. Un metodo per il trattamento della cataratta secondo la rivendicazione 7, in cui bendazac viene somministrato in forma di un sale di lisina. 11. Un metodo per il trattamento della cataratta secondo la rivendicazione 1 in cui detto bendazac è sotto forma di un sale farmaceuticamente accettabile. Correlate a questa invenzione è un'applicazione statunitense n. No. 269.923 depositata il 2 giugno 1981 di brevetto statunitense. No. 4.352.813. BACKGROUND DELL'INVENZIONE Cataratta è una malattia dell'occhio che consiste in opacizzazione della lente, un corpo bioconvex interposto tra le camere anteriori e il corpo vitreo dell'occhio. La lente ha la funzione di focalizzare i raggi luminosi sulla retina dove vengono percepiti e trasmessi al cervello sotto forma di impulsi visivi. Cataract è, thererefore, accompagnato da una diminuzione della capacità visiva, che nei casi più gravi conduce blindess. Per indicare l'importanza medica e sociale di questa malattia è sufficiente ricordare che la cataratta senile colpisce 4,6 per cento della popolazione tra gli anni 52 e 64, 18 per cento di età compresa tra i 65 e 74 e il 46 per cento di età compresa tra 75 e 85 anni (Kini et al. 1978). La lente è circondato da una capsula elastico collagene che contiene le cellule della fibra; la sua componente principale è un gel proteico omogenea, trasparente che ha la stessa funzione del vetro nella lente artificiale. Con l'aumentare dell'età oa causa di una serie di fattori diversi (diabete e altri disturbi metabolici, traumi, raggi X, substrances tossici contenenti alcuni farmaci, etc.). Le fibre lente diventano opachi e sciolto la trasparenza burbero. Fino a poco tempo questi cambiamenti sono stati considerati irreversibili. Si è pensato che l'unica cura possibile per la cataratta è la rimozione chirurgica del cristallino che è stato poi sostituito con lente artificiale esterna o interna impiantato dietro l'occhio (Nevyas, 1980). Gli unici buoni risultati riportati con qualche trattamento farmacologico sono stati un possibile rallentamento nello sviluppo della cataratta. Questo è, per esempio, il caso di Catalin o 1-idrossi-5-oxo-5H-pirido [3,2-a] acido phenoxazino-3-carbossilico (Hayashi et al. 1979) e di aspirina o acido acetilsalicilico (Cotlier e Sharma, 1980). Il meccanismo di azione di questo composto è stato pensato per essere dovuto alla riduzione dei livelli di triptofano siero o per l'inibizione della o-diphenoloxidase (Prabhakaran, 1981). Le ricerche condotte negli ultimi anni hanno dimostrato che opacizzazione della lente è associato ad una denaturazione del gel proteico trasparente rendendo la lente (Davson, 1980). In cataratta vi è un aumento della produzione di macromolecole giganti costituiti da subunità aggregati legate da legami disolfuro che tendono a precipitare. Questi legami sono covalenti in natura e possono essere divisi dagli enzimi proteolitici fisiologicamente presenti nei tessuti. L'attività di questi enzimi rappresentano pertanto la capacità della lente di mantenere la sua natura trasparente per tutta la vita, nonostante il fatto che esso è continuamente esposto all'azione di agenti esogeni o endogeni capaci di produrre denaturazione e aggregazione delle proteine lente. Lens opacizzazione si verifica quando la denaturazione proteica oltre le capacità difensive degli enzimi nella lente. Queste considerazioni possono suggerire l'uso di alcuni enzimi nel trattamento della cataratta. Questa idea è però difficile da mettere in pratica, perché queste sostanze molto raramente penetrare attraverso la membrana biologica e anche perché la nostra conoscenza attuale non è sufficiente per preparare adeguatamente gli enzimi specifici per i suddetti aggregati proteici lente. L'idea di base di questa scoperta è invece quella di utilizzare una sostanza in grado di rallentare i fenomeni di denaturazione proteica lente causando opacizzazione, e permettendo gli enzimi naturali presenti in questo tessuto di agire adeguatamente su aggreates già formata. In altre parole, si propone di migliorare la correlazione tra i meccanismi di difesa enzimatici della lente e l'intensità dei fenomeni di aggregazione proteica, presumendo che in questo modo sarebbe teoricamente possibile avere la regressione fisiologica della cataratta. Per mettere in pratica questa idea abbiamo deciso di sfruttare l'esperienza accumulata nelle ricerche precedenti eseguite su denaturazione delle proteine e la sua possibile prevenzione con farmaci anti-denaturante. Queste indagini hanno dimostrato che diversi farmaci antinfiammatori possiedono una attività anti-denaturante sulle proteine (per una rassegna sull'argomento vedi Mizushima, il 1968 e il Silvestrini, 1968). Queste sostanze sono, tuttavia, troppo specifici e troppo tossici da impiegare per tale uso; d'altra parte, abbiamo già detto che studi eseguiti con acido acetilsalicilico hanno dimostrato che questa sostanza ritarda lo sviluppo di cataratta, ma non ne determina la regressione (Cotlier e Sharme, 1980). Nei apparso potenzialmente adatto per questo uso è stato invece bendazac un farmaco con un molto specifica attività anti-denaturante su alcune proteine del sangue (Silvestrini et al. 1969 1969a e 1970). Era necessario, tuttavia, per scoprire se questa sostanza agiva anche proteine lente; il problema del suo assorbimento orale nell'uomo ha dovuto essere risolto poiché sulla base di indagini ultime assorbimento orale portato troppo bassa (Silvestrini et al. 1969). Bendazac è l'oggetto della domanda di brevetto italiana No. 19723 depositata on Ago 29, 1966 e successivamente depositata in altri paesi, compreso il U. S.A. La corrispondente brevetto italiano No. 1.043.762 è stato concesso il 29 febbraio, 1980 e brevetto statunitense. No. 3.470.194 concesso il 30 settembre, 1969. Le proprietà anti-denaturante di bendazac sono menzionati in questi brevetti ma non si parla o ipotesi è fatta di sorta sul suo effetto curativo sulla cataratta. Non esiste alcun farmaco anti-cataratta in letteratura che in qualche modo simile bendazac. Esperimenti in vitro: uno studio è stato effettuato su entrambi omogenati lenti e lenti intatto. L'opacizzazione di questo materiale è stata ottenuta mediante riscaldamento. A questo scopo è stato utilizzato lo stesso metodo che già impiegati per studiare le proteine del sangue (Silvestrini et al 1968;.. Silvestrini et al 1970) con alcune modifiche minori che sono di seguito riportati. Per lo studio della omogenato, lenti topo freschi sono stati usati che è stato rimosso dalla capsula, immerso in tampone fosfato (pH 7,5; 0,1 M) in rapporto volumetrico di 15:85 e poi omogenati. L'omogenato è stato centrifugato (10 minuti a 4000 giri al minuto), il supernatante è stato raccolto e ulteriormente diluito 1: 1 con tampone fosfato di cui sopra, da sola o contenente bendazac a diverse concentrazioni. La soluzione così ottenuta è stata riscaldata a 60 ° C per 20 minuti e la denaturazione è stata valutata Nefelometricamente. I risultati ottenuti sono riportati in Tabella 1. Come riferimento viene effettuato un confronto con i valori ottenuti con siero albumina bovina (BSA) denaturazione. I risultati ottenuti dimostrano che bendazac impedisce denaturazione indotta dal calore di omogenato lente e che questo effetto protettivo è simile a quella osservata con BSA. L'esperimento è stato ripetuto impiegando diversi sali di bendazac compreso litio, sodio, potassio, ammonio, basi organiche (quali etilendiammina, piperazina e diisopropilammina) e lisina. Alle stesse concentrazioni molari, tutti questi sali esercitato lo stesso effetto anti-denaturante sul omogenato dell'obiettivo come quella del solo bendazac. Questo esperimento dimostra che l'ingrediente attivo è bendazac. La lente intatto è stato studiato utilizzando lente bovine fresche che sono state conservate per 2 ore in tampone fosfato sopra descritto, da sola o contenente bendazac a diverse concentrazioni. Le lenti sono stati poi riscaldati a 50 ° C per 120 minuti; questa procedura ha prodotto una opacizzazione chiara nella regione sottocapsulare. Il grado di opacizzazione è stato valutato alla cieca (sperimentatore era a conoscenza del trattamento), con un punteggio da 0 a 4. I risultati ottenuti sono riportati in Tabella 2. Bendazac esercita un effetto protettivo netta su questo cataratta indotta sperimentalmente anche se le concentrazioni sono superiori a quelli attivi nel precedente esperimento. La prova è stata ripetuta utilizzando i vari sali di bendazac cui sopra e in questo caso anche con le stesse concentrazioni molari dei risultati ottenuti erano identici a quelli osservati con la sola bendazac. Indagini su assorbimento orale nell'uomo del sale di lisina di bendazac È noto in letteratura che l'assorbimento orale di bendazac nell'uomo è piuttosto bassa; dopo 8 giorni di trattamento con bendazac all'aumento fa da 150 a 900 mg al giorno i livelli ematici di prodotto sono risultate 8 mcg (Silvestrini et al. 1968). Questi livelli ematici sono apparsi troppo bassi per ottenere attività terapeutica. Abbiamo ora trovato che il sale di lisina di bendazac è meglio assorbito nell'uomo che da soli bendazac; come verrà ulteriormente sottolineato nella sezione Chimica, questo sale di lisina è un biidrato. Come mostrato nella Tabella 3, dopo una singola somministrazione orale di 500 mg di sale di lisina di bendazac, corrispondenti a 303,8 mg di bendazac, la concentrazione plasmatica media trovato in 6 volontari 2 ore dopo la somministrazione era 30 mcg / ml; alle stesse condizioni i livelli sierici ottenuti con 300 mg di bendazac soli sono 8 mcg / ml. Questi risultati dimostrano che il sale di lisina di bendazac è una forma adatta per ottenere concentrazioni tissutali efficaci. Studio sulla attività anti-cataratta nell'uomo Un primo esperimento è stato condotto su 24 pazienti con diversi tipi di cataratta (corticale; corticonuclear, posterior sottocapsulari). la storia clinica dei pazienti ha mostrato che la loro cataratta è stata rapidamente progredendo. L'esperimento comprendeva un esame della vista, rifrazione e test-lampada a fessura; l'investigatore è stato chiesto di esprimere un giudizio complessivo. Tali valutazioni sono state effettuate prima dell'inizio del trattamento, dopo 4 settimane e di nuovo alla fine del trattamento, quando prolungato. Il sale di lisina di bendazac è stato somministrato alla dose di 1500 mg (corrispondente a 911,5 mg di bendazac) suddivisi in tre somministrazioni giornaliere durante i pasti. La durata media del trattamento è stata di 50,4 giorni con limiti di tempo da 28 a 86 giorni. Il gruppo di studio era costituito da 11 donne e 13 uomini con un'età media di 59,5 (47-74). Gli effetti del trattamento sono riassunti nella tabella 3; i valori ottenuti in ciascun paziente sono illustrate invece nella Tabella 4. In pratica, i risultati sono espressi come: miglioramento (+), nessun cambiamento (0), peggioramento (-). In questo esperimento il sale di lisina di bendazac prodotto un miglioramento in un alto numero di pazienti (10-18, a seconda del metodo di valutazione), mentre solo 1 paziente ha mostrato un effetto deterioramento. Relativamente scarsi risultati sono stati ottenuti in 5 pazienti, uno dei quali era un diabetico. Come risultato di questi risultati incoraggianti abbiamo deciso di ripetere l'esperimento in condizioni doppio cieco confrontando il sale di lisina di bendazac con placebo. Un totale di 35 pazienti sono stati utilizzati; 19 sono stati trattati con placebo e 16 con il sale di lisina di bendazac. I metodi sperimentali utilizzate sono identiche a quelle descritte nel primo esperimento, tranne per la durata del trattamento che era sempre 4 settimane. I risultati sono riassunti nella Tabella 5. I valori ottenuti in ogni paziente sono invece riportati in Tabella 6. Questo secondo studio ha confermato senza alcun dubbio che l'amministrazione del sale di lisina di bendazac ha un effetto curativo sulla cataratta. Infine, bendazac è stato somministrato in 4 pazienti sotto forma di gocce oculari contenenti 0,25% del sale di lisina di bendazac. Collirio sono stati instillati 3 volte al giorno per un mese. Anche in questo gruppo di pazienti è stata osservata una regressione chiara della cataratta. I dati riportati dimostrano che da sola o in forma di sali diversi bendazac esercita un'azione protettiva in vitro rispetto al opacizzazione della lente. Negli esseri umani il sale di lisina di bendazac ha mostrato di essere particolarmente adatto per ottenere gli effetti terapeutici desiderati a causa del suo buon assorbimento orale. Inoltre, nei pazienti con cataratta, questo composto induce una regressione della malattia dopo somministrazione orale e l'applicazione topica sull'occhio. Questa scoperta è di importanza medica massima poiché apre nuove prospettive per il trattamento della cataratta. Pertanto la presente invenzione fornisce un metodo per il trattamento della cataratta in un essere umano comprendente somministrazione a detto umana una quantità efficace di bendazac. Il bendazac può essere somministrata per via orale e preferibilmente detto bendazac viene somministrata in una quantità sufficiente ad ottenere un livello ematico efficace di 20-40 pg / ml nell'intervallo 455 a 1824 mg al giorno in una forma farmaceutica accettabile adatto per ottenere concentrazioni tissutali efficaci . Come detto una realizzazione preferita bendazac viene somministrato in forma del suo lisina sale idrato ad un dosaggio da 750 a 3000 mg al giorno. Questo dosaggio può perferably essere somministrato suddiviso in 2 o più dosi al giorno. Bendazac può pure preferibilmente essere somministrata direttamente nell'occhio interessato per il trattamento della cataratta. Quando somministrato direttamente all'occhio un procedimento preferito è quello adminster il bendazac nella forma di una composizione comprendente un veicolo farmaceutico accettabile tenuto bendazac concentrazione nel range di 0,1-1 per cento. Quando la composizione bendazac farmaceutica viene utilizzato un procedimento preferito per il trattamento della cataratta è uno in cui detto bendazac viene somministrato 2 o 3 volte al giorno, la quantità di 3 gocce per ogni applicazione ed è anche preferito in cui detto bendazac viene somministrato in la forma del suo sale idrato lisina. Per ottenere il sale bendazac con lisina la preparazione viene effettuata mediante riscaldamento, preferibilmente in etanolo o acqua-acetone, quantità equimolecolari di [(1-benzil-1H-indazol-3-il) ossi] acetico e l'aminoacido. Il sale cristallizza per raffreddamento come biidrato. Il sale così ottenuto può essere utilizzato come tale o dopo essiccamento sotto vuoto fino a peso costante. Sia il biidrato e sali anidri con una o l'altra forme otticamente attive di lisina e il sale con lisina racemica possono essere impiegati in diverse forme farmaceutiche. In uso, il composto dell'invenzione è somministrato oralmente in formulazioni convenzionali, cioè in associazione con eccipienti farmaceutici generalmente utilizzate per la produzione di composizioni per la somministrazione orale. Dosi tra 0,3 ge 1,5 g devono essere somministrato quotidianamente, eventualmente suddivisi in 2 o più somministrazioni. composizioni farmaceutiche convenzionali per la somministrazione orale possono essere utilizzati quali compresse e capsule; la dose unitaria sia tavolo e capsule di ingrediente attivo può essere 100-500 mg. I vettori utilizzati nella preparazione di queste composizioni sono eccipienti noti nell'arte farmacista. Nella preparazione di compresse, eccipienti tipici includono agenti disgregatrici, ad esempio amido di mais e lubrificanti agenti ad esempio stearato di magnesio; nella preparazione di capsule, capsule di gelatina standard possono essere utilizzati contenente il principio attivo da solo o in miscela con un diluente. Anche in applicazioni topiche sull'occhio il composto viene utilizzato in forma di collirio convenzionali, ben noto alle persone abili nella tecnica. I seguenti esempi non limitativi illustrano la preparazione del sale che è oggetto della presente invenzione. Sale di [(1-benzil-1H-indazol-3-il) ossi] acetico con L. lisina (diidrato). 12 g (0,042 moli) di [(1-benzil-1H-indazol-3-il)] ossi acetico e 6,2 g (0,042 moli) di L. lisina sono stati sciolti in 100 ml di etanolo al 95% per il riscaldamento. La miscela viene filtrata calda per rimuovere le piccole quantità di impurezze e venne poi lasciata riposare per una notte a temperatura ambiente. Il prodotto cristallino è stato filtrato e ricristallizzato da etanolo 95%: 15 g del sale è stato ottenuto (resa 75,9%), mentre dalla madre-liquor un'altra quantità di prodotto è stato ottenuto parzialmente evaporare il solvente. Il prodotto ha un punto di fusione a 178-81 ° C con perdita di acqua durante il riscaldamento. Il sale ottenuto secondo l'esempio 1 è stato essiccato sotto vuoto (5-10 Torr.) A 105 ° C fino a peso costante: anche in questa forma mostra un punto di fusione a 178-81 ° C con decomposizione. KINI, M. M. Leibowitz, H. M. Colton, J. NICKERSON, R. J. Ganley, J. Dawber, T. R. Am. J. Ophthalmol 85, 28, 1978. NEVYAS H. J. oculare forma e dimensione, il regolamento durante lo sviluppo. (eds. Hilfer S. R. e Sheffield J. B.), Springer-Verlag, New York, pp 189-207, 1980. HAYASHI, H. e Nishida, T. La Folia Ophthalmologica Japonica, vol. 30, No. 4 1979. COTLIER, E. e Sharme, Y. R. Lancet, I, 607, 1980. Prabhakaran, K. Patologia, 9, 928, 1981. Davson, H. fisiologia dell'occhio, 4a edizione, Academic Press, New York, pp 116-164, 1980. Mizushima, Y. In: Infiammazione, Proc. Int. Simp. Bologna 1967. Eds. Silvestrini, B. Tura, S. Spector, W. G. Excerpta Medica Foundation, Amsterdam, pp 37-43, 1968. SILVESTRINI, B. In: Infiammazione, Proc. Int. Simp. Bologna 1967 Eds. Silvestrini, B. Tura, S. Spector, W. G. Excerpta Medica Foundation, Amsterdam, pp 26-36, 1968. SILVESTRINI, B. CIOLI, V. e burberi, S. Arzneim. Forsch. 19, 30-36, 1969. SILVESTRINI, B. CATANESE, B. e LISCIANI, R. In: Infiammazione Biochimica e di interazione farmacologica. Proc. Int. Simp. Como, 1968. Eds. Bertelli, A. Houck, J. C. Excerpta Med. Foundation, Amsterdam, pp 283-288, 1969. SILVESTRINI, B. CATANESE, B. LISCIANI, R. e ALESSANDRONI A. Arzneim. Forsch. 20, 250-253, 1970.
No comments:
Post a Comment